मात्रा निर्धारित करने के लिए एक वैज्ञानिक विधि NMN जैविक नमूनों में
1. परिचय
का पूरकतानिकोटिनमाइड मोनोन्यूक्लियोटाइड (एनएमएन)निकोटिनमाइड के स्तर को विनियमित करने के लिए एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड (एनएडी +) को एक आशाजनक एंटी-एजिंग हस्तक्षेप के रूप में अनावरण किया गया है। हालाँकि, NAD+ मध्यवर्ती पदार्थों को सटीक रूप से मापना अभी भी एक गंभीर चुनौती है,एनएमएनविशेष रूप से। यह अध्ययन एक नई विधि, डबल आइसोटोप-मध्यस्थता एलसी-एमएस/एमएस पद्धति (डीआईएमईएलसी-एमएस/एमएस) पेश करने के लिए संचालित है, जो सटीक परिमाणीकरण के लिए हैएनएमएनजैविक नमूनों में।
2. सटीक पहचान को प्रभावित करने वाले कारक NMN
NMN एंजाइमेटिक गिरावट, नमूना प्रसंस्करण में रूपांतरण, विभिन्न स्तंभों और निष्कर्षण स्थितियों में इसके जटिल व्यवहार के साथ-साथ मैट्रिक्स प्रभाव के प्रति इसकी भेद्यता के कारण सटीक रूप से पता लगाना कठिन है।
विशेष रूप से, NMN इसमें उच्च ध्रुवता और कम अस्थिरता के गुण हैं, जो पानी में घुलना आसान है लेकिन कार्बनिक सॉल्वैंट्स में घुलना मुश्किल है। ये गुण कई पारंपरिक मात्रात्मक विश्लेषण विधियों के अनुप्रयोग को बहुत प्रतिबंधित करते हैं।
जन्मइओलॉजिकल नमूनेउदाहरण के लिएरक्त CD38 और CD73 (एक्टो-5) की महत्वपूर्ण गतिविधियों को वहन करता है’-न्यूक्लियोटिडेज़), जो दोनों उपयोग कर सकते हैं NMN एक सब्सट्रेट के रूप में।
का व्यवहार NMN कॉलम में शायद इसके आवेशों की द्विदलीय प्रकृति के कारण बहुत जटिल है ताकि निष्कर्षण और स्तंभ स्थितियों में सूक्ष्म अंतर विश्वसनीय और सटीक पहचान को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करें NMN.
3. मुकाबला करने की रणनीतियाँडाइमएलसी-एमएस/एमएसप्रभाव कारकों के प्रभाव को कम करने के लिए
उपर्युक्त कारकों के हस्तक्षेप से बचने के लिए, एक प्रोटोटाइप कॉलम NMN-2 लागू किया जाता है। इस कॉलम में C18-आधारित उच्च-शुद्धता वाले सिलिका कण होते हैं जो कार्बन कणों की तुलना में हाइड्रोफिलिक यौगिकों को बांधने में अधिक सक्षम होते हैं, जिससे पृथक्करण की क्षमता में सुधार होता है।
पर्क्लोरिक एसिड (पीसीए) का उपयोग किया जाता है क्योंकि यह कुशलता से निकाल सकता है एनएडी + और एनएमएन न्यूनतम नुकसान के साथ प्लाज्मा जैसे जैविक नमूनों से।
मैट्रिक्स प्रभाव के लिए समायोजित करने के लिए, पीसीए निष्कर्षण से पहले प्रत्येक समस्थानिक यौगिक की एक निश्चित मात्रा (1 माइक्रोन) जैविक नमूनों में जोड़ी जाती है।
4. लाभदक्षिणीडाइमएलसी-एमएस/एमएस की
डबल आइसोटोपिक NMN मानक, NMN (M + 14) और NMN (M + 5), LC-MS/MS-संचालित पद्धति में सटीक रूप से भाग्य का पता लगा सकते हैं NMN नमूना प्रसंस्करण के दौरान, जो सटीकता और विश्वसनीयता को काफी बढ़ाता है NMN जैविक नमूनों में माप। इसके अलावा, डाइमएलसी-एमएस/एमएस निष्कर्षण दक्षता और की पूर्ण सांद्रता का मूल्यांकन कर सकते हैं NMN विभिन्न प्रकार के जैविक नमूनों में।
5. निष्कर्ष
वांहैनया एलसी-एमएस/एमएस-डबल आइसोटोपिक के साथ संचालित कार्यप्रणाली NMN मानक सटीक और मज़बूती से माप सकते हैं NMN जैविक नमूनों में।इसका उपयोग भविष्य के अध्ययन के लिए किया जा सकता है NMN सेवन।
6. संदर्भ
"डबल आइसोटोप-मध्यस्थता तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (डाइमएलसी-एमएस/एमएस) द्वारा जैविक नमूनों में निकोटिनमाइड मोनोन्यूक्लियोटाइड का पूर्ण परिमाणीकरण। " एनपीजे एजिंग वॉल्यूम 10,1 2. 2 जनवरी 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
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