मात्रा निर्धारित करने के लिए एक वैज्ञानिक विधि NMN जैविक नमूनों में
1. परिचय
का पूरकतानिकोटिनमाइड मोनोन्यूक्लियोटाइड (एनएमएन)अपरेगुलेट करने के लिएस्तर कानिकोटिनमाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड (एनएडी +)एक आशाजनक एंटी-एजिंग हस्तक्षेप के रूप में अनावरण किया गया है। हालाँकि, यह अभी भी है सटीक रूप से एक गंभीर चुनौतीएनएडी + मध्यवर्ती मात्रा निर्धारित करें, एनएमएन विशेष रूप से। यह अध्ययन एक नई विधि, डबल आइसोटोप-मध्यस्थता एलसी-एमएस/एमएस पद्धति (डीआईएमईएलसी-एमएस/एमएस) पेश करने के लिए संचालित है, जो सटीक परिमाणीकरण के लिए हैएनएमएन जैविक नमूनों में.2. सटीक पहचान को प्रभावित करने वाले कारक NMN
NMN एंजाइमेटिक के प्रति इसकी भेद्यता के कारण इसका सटीक पता लगाना कठिन हैगिरावट, नमूना प्रसंस्करण में रूपांतरण, विभिन्न स्तंभ और निष्कर्षण स्थितियों में इसके जटिल व्यवहार, साथ ही मैट्रिक्स प्रभाव।
विशेष रूप से, NMN इसमें उच्च ध्रुवता और कम अस्थिरता के गुण हैं, जो पानी में घुलना आसान है लेकिन कार्बनिक सॉल्वैंट्स में घुलना मुश्किल है। ये गुण कई पारंपरिक मात्रात्मक विश्लेषण विधियों के अनुप्रयोग को बहुत प्रतिबंधित करते हैं।
जन्मइओलॉजिकल नमूनेजैसे कि रक्त CD38 और CD73 (एक्टो-5) की महत्वपूर्ण गतिविधियों को वहन करता है’-न्यूक्लियोटिडेज़), जो दोनों उपयोग कर सकते हैं NMN एक सब्सट्रेट के रूप में।
का व्यवहार NMN कॉलम में शायद इसके आवेशों की द्विदलीय प्रकृति के कारण बहुत जटिल है ताकि निष्कर्षण और स्तंभ स्थितियों में सूक्ष्म अंतर विश्वसनीय और सटीक पहचान को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करें NMN.
3. मुकाबला करने की रणनीतियाँडाइमएलसी-एमएस/एमएस प्रभाव कारकों के प्रभाव को कम करने के लिए
उपर्युक्त कारकों के हस्तक्षेप से बचने के लिए, एक पीरोटोटाइपस्तंभएनएमएन-2 लागू किया जाता है। यह कॉलमनियंत्रित करनादक्षिणी C18-आधारित उच्च शुद्धता वाले सिलिका कण जो कार्बन कणों की तुलना में हाइड्रोफिलिक यौगिकों को बांधने में अधिक सक्षम हैं, जिससे पृथक्करण की क्षमता में सुधार होता है।Pएर्क्लोरिक एसिड (पीसीए) नियोजित है क्योंकि यह कर सकता है कुशलतापूर्वक NAD+ निकालें और NMN जैविक नमूनों से जैसे कि न्यूनतम प्लाज्मा के साथ नुकसान.
मैट्रिक्स प्रभावों को समायोजित करने के लिए,a प्रत्येक की निश्चित मात्रा (1 माइक्रोन) समस्थानिक यौगिकis में जोड़ा गयाजैविक पीसीए निष्कर्षण से पहले नमूने.
4. लाभदक्षिणी डाइमएलसी-एमएस/एमएस की
Double समस्थानिक NMN मानक, NMN (एम + 14) और NMN (एम + 5), एलसी-एमएस/एमएस-संचालित पद्धति में इसके भाग्य का सटीक पता लगा सकते हैं NMN नमूना प्रसंस्करण के दौरान, जोकी सटीकता और विश्वसनीयता में काफी वृद्धि होती है NMN जैविक नमूनों में माप. इसके अलावा, डाइमएलसी-एमएस/एमएस निष्कर्षण दक्षता और की पूर्ण सांद्रता का मूल्यांकन कर सकते हैं NMN विभिन्न प्रकार के जैविक नमूनों में।
5. निष्कर्ष
वेंहै नया एलसी-एमएस/एमएस-डबल आइसोटोपिक NMN मानकों के साथ संचालित कार्यप्रणाली कर सकते हैं एक्यूरातेली और रिलीबली मापें NMN जैविक नमूनों में। इसका उपयोग भविष्य के अध्ययन के लिए किया जा सकता है NMN सेवन।6. संदर्भ
"डबल आइसोटोप-मध्यस्थता तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (डाइमएलसी-एमएस/एमएस) द्वारा जैविक नमूनों में निकोटिनमाइड मोनोन्यूक्लियोटाइड का पूर्ण परिमाणीकरण। " एनपीजे एजिंग वॉल्यूम 10,1 2. 2 जनवरी 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1क्यों चुनेंबोंटैक?
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